［摘要］銀屑病是一種多基因遺傳性基礎上免疫介導的、慢性復發性炎癥性皮膚病。點滴狀銀屑病屬于尋常性銀屑病之一，該型銀屑病的臨床表現以紅斑、丘疹、鱗屑表現為主。玫瑰糠疹病因不清，有學者認為與人類皰疹病毒 6 型(HHV-6)與人類皰疹病毒 7 型(HHV7)感染有關，也是一種紅斑丘疹鱗屑性皮膚病。點滴狀銀屑病與玫瑰糠疹二者都好發于軀干部位，肉眼看來有很多相似之處。典型的點滴狀銀屑病與玫瑰糠疹是容易鑒別的，前者有刮臘現象、薄膜現象與點狀出血等特征，后者皮疹的長軸與皮紋方向一致，且部分玫瑰糠疹可以有子母斑等進行鑒別。但不典型的點滴狀銀屑病與不典型的玫瑰糠疹，二者靠肉眼鑒別有一定困難，此時做皮膚組織病理檢查是有價值的鑒別診斷方法。但皮膚組織病理檢查是一種有創傷取材方法，患者依從型差。我們根據點滴狀銀屑病與玫瑰糠疹二者皮疹表層的細胞學種類不同，用透明膠帶粘貼皮疹區表層脫落細胞的無創性取材方法鑒別這兩種疾病，實驗結果滿意。
［關鍵詞］銀屑病、飲食、病毒、疾病
1. 1 研究對象 均為 2015 年 9 月 － 2016 年 12 月至本院皮膚科就診的患者，對臨床表現不典型的銀屑病患者及和玫瑰糠疹患者皮損進行組織病理學檢查，均簽署知情同意書。選擇組織病理診斷為點滴狀銀屑病與玫瑰糠疹的患者各 30 例，其中銀屑病組患者中男 18 例，女 12 例，年齡 39. 50 ± 21. 55;玫瑰糠疹組患者中男 14 例，女 16 例，年齡 32. 33 ± 23. 75。兩組患者的性別構成比和年齡均具有可比性。
1. 2 試劑和材料 HE 染液，一抗為鼠抗人粒細胞髓過氧化物酶抗體，二抗為辣根過氧化物酶標記的兔抗鼠 Ig G 多克隆抗體，二氨基聯苯胺(DAB)為底物顯色試劑盒，均購自美國 Bio Genex公司。EAF 固定液配置:取冰醋酸 5mL，40% 甲醛 10mL，無水乙醇加至 100mL。
1. 3 方法
1. 3. 1 標本采集 兩組患者均予市售透明膠帶粘貼于皮疹部位，3s 后揭下棄去(去除表面干燥脫落細胞)，然后同法在相同部位分別粘貼 3 條膠帶取材，供實驗用。帶有標本的膠帶做HE 染色( 去除最初 2 步二甲苯脫蠟步驟) 及免疫組織化學染色，并進行組織細胞學檢查。每位患者再進行脫落細胞取材的同時，將兩組患者的非透明膠帶粘貼皮疹區選擇一處做皮膚組織病理檢查，進行 HE 染色。
1. 3. 2 標本 HE 染色 有脫落細胞標本的膠帶固定于載玻片上，粘有細胞一面朝上制作標本和標記。取其中一張標本用95% 酒精固定，改良 HE 染色，即宮頸表皮細胞染色方法，脫水透明，中性樹膠封片后，光鏡下觀察。
1. 3. 3 免疫組織化學染色 取剩余兩張標本用 EAF 固定液在
4℃ 下固定 15min，PBS 沖洗，按試劑盒說明書進行操作。其中
一張標本作為空白對照，另外一張標本做 DAB 顯色和 HE 復
染，各 40s。染色和脫水，中性樹脂封片，用于光鏡下觀察。
1. 3. 4 皮損標本 HE 染色 見組織病理操作規程。
1. 4 診斷標準 膠帶標本 HE 染色結果中，光學顯微鏡下細胞核形態來判斷細胞類型，將細胞核呈現分葉或桿狀判定為中性粒細胞，而圓形或近圓形核為皮膚鱗狀細胞，即相當于皮膚組織病理 HE 染色法的角質層角化不全細胞或顆粒層細胞。同時觀察中性細胞分布狀態，即分散或聚集分布。顯微鏡下出現群集狀分布的中性粒細胞為陽性，診斷為銀屑病;未見中性粒細胞或者出現少量散在分布的中性粒細胞為陰性，診斷為玫瑰糠疹。脫落細胞法檢測若見中性細胞群聚分布，則判為陽性結果，診斷為點滴狀銀屑病;若非群集分布診斷( 中性細胞分散分布 + 無中性細胞)則判為陰性結果，診斷為玫瑰糠疹。透明膠帶法診斷銀屑病的診斷率(% ) = a/(a + b)，玫瑰糠疹診斷率(% ) = d/(c + d)，總診斷準確率(% ) = ( a + d) /( a + b+ c + d) 。
1. 5 統計學處理 用 SPSS13. 0 軟件，比較透明膠帶法診斷結果與組織病理 HE 染色法診斷結果的符合率及中性粒細胞在兩組患者中分布情況采用 χ2檢驗，P ＜ 0. 05 為差異有統計學意義。
2. 1 透明膠帶 HE 染色結果 兩組患者皮損的中性細胞分布情況見表 1，脫落細胞法診斷率與組織病理法診斷情況比較結果見表 2，兩組患者的中性細胞群集發生率差異有統計學意義(χ2= 52. 50，P ＜ 0. 01 ) 。透明膠帶粘貼正常皮膚、點滴狀銀屑病皮疹、玫瑰糠疹皮疹，進行 HE 染色后，顯微鏡下脫落細胞分布情況見圖 1 ～ 3。
2. 2 免疫組織化學染色結果 點滴狀銀屑病組患者標本中粒細胞髓過氧化物酶單抗染色陽性區域有群集細胞核為分葉狀和桿狀者，進一步證實此類細胞是中性粒細胞，因為中性粒細
胞含有髓過氧化物酶(圖 4)。
2. 3 診斷符合率比較 見表 2。透明膠帶細胞法對點滴狀銀屑病和玫瑰糠疹的診斷符合率分別為 93. 33% 和 100. 00% ，總診斷準確率為 96. 67% 。
透明膠帶取材法從皮疹區粘取毛囊蠕形螨、疥螨、淺部真菌等已經應用多年。但應用透明膠帶粘貼皮疹脫落細胞用于研究皮膚病的診斷問題，在國內外文獻中罕有報告。近年來，
國內學者陳向明等率先研究用透明膠帶粘貼皮疹區的表皮脫落細胞，鑒別不典型斑塊狀銀屑病與不典型錢幣狀濕疹，在小樣本內取得了滿意結果。本研究采用皮疹區脫落細胞法鑒
別不典型的點滴狀銀屑病與不典型玫瑰糠疹。我們知道，無論進展期銀屑病還是靜止期銀屑病，乃至各型別銀屑病皮損最關鍵特異的組織病理特征是在角質層的角化不全上部有中性粒
細胞聚集即 Muro 微膿腫，在點滴狀銀屑病 Muro 微膿腫可以呈駝峰樣。Muro 微膿腫的發生機制與 IL-8引起的中性粒細胞趨化密切相關。Muro 微膿腫這個獨特的組織病理特點為利用透明膠帶粘貼皮疹表層脫落細胞法診斷銀屑病提供了理論及實驗依據。而玫瑰糠疹組織病理的表皮層有灶性角化不全，通常沒有Munro 微膿腫形成，我們在組織病理診斷為玫瑰糠疹患者的透明膠帶脫落細胞方法中也印證了這一點。
將組織病理診斷為點滴狀銀屑病及玫瑰糠疹者作為兩種疾病診斷的金標準(即診斷率為 100. 00% )。本透明膠帶脫落細胞診斷法分別與其比較，結果銀屑病的診斷率為 93. 33%
(28 /30)，玫瑰糠疹的診斷率為 100. 00% (30 /30)，總準確率96. 67% 。表明該實驗方法非常接近金標診斷法，表明該研究有重要臨床應用價值。
本研究通過免疫組化法證實這些簇集的桿狀核及分葉核細胞全部為中性粒細胞，表明 HE 染色法即可獨立用于中性粒細胞定性，這樣在臨床實際應用中就不必做免疫組化染色，可以顯著降低檢驗成本。關于2 例點滴狀銀屑病患者的中性粒細胞呈散在分布，其可能與粘貼膠帶偏離皮疹有關，沒有粘取到中性粒細胞群集區域所在的部位，或者與一次性取材恰好粘貼到角化不全層，而遺漏的下面的 Muro 微膿瘍層，所以建議在皮疹區連續粘貼 2 次，可能會提高陽性比例。在表皮角質層中，中性粒細胞浸潤的疾病除銀屑病外，還有體癬、膿皮病、膿皰病、念珠菌病、脂溢性皮炎和梅毒等。但這些疾病在臨床表現及其他實驗室檢查方面可以鑒別，不在本研究范圍內。
本項透明膠帶粘貼皮疹表皮脫落細胞法的適用范圍是已經排除其他類似皮膚病，僅僅在不典型點滴狀銀屑病與不典型玫瑰糠疹二者無法鑒別時使用。盡管透明膠帶脫落細胞診斷法不像皮膚組織病理那樣可以縱向地看到表皮、真皮及皮下組織病理情況，但該法具有操作簡單、檢驗成本低、患者依從性高等優點，有進一步研究與應用價值。
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